110

ردیابی کمبود کوبالامین (Cb1) در بیمارانی که یافته‏ هماتولوژی (کم‏خونی، ماکروسیتوز، نوتروفیل هیپرسگمانته، لکوپنی و ترومبوسیتوپنی) غیر طبیعی دارند، بویژه ارزیابی هیپرسگمانتاسیون در گرانولوسیت‏ها، MCV بالاتر از 98 فمتولیتر؛ تشخیص کم خونی ماکروسیتیک‏ و مگالوبلاستیک؛کمک به تشخیص علت زوال عقل یا سایر یافته‏های عصبی (کرختی، مورمور شدن و کاهش حس ارتعاش در اندام‎ها)؛بررسی الکلیسم و سوء جذب.

الکتروکمی لومینسانس

Cyanocobalamin, Active B12, Cobalamin, CbIC, Intrinsic-Factorکوبالامین، سیانوکوبالامین،

سرم

1 ml

نمونه در دمای اتاق تا 2 ساعت پایدار است.نمونه در دمای 4°C برای 7 روز پایدار است، درغیر این صورت فریز نمایید. نمونه در فریزر (-20°C) تا 3 ماه پایدار است.جهت انجام آزمایش بالافاصله نمونه را به بخش مربوطه انتقال دهید.

زنجیره سرد

ü همولیز سرم متوسطü نمونه ای به غیر از سرمü ذوب و فریز مکرر نمونهü نمونه هایی که برای بیش از 8 ساعت در دمای اتاق قرار گرفته اند.ü نمونه های با برچسب اشتباه و یا عدم بر چسب.

ترجیحاً بیمار 8 ساعت ناشتا باشد.از مصرف مکمل ویتامین B12 پیش از انجام آزمایش اجتناب نمایید.نمونه‏گیری باید قبل از ترانسفوزیون یا شروع درمان با B12 صورت گیرد. بیمار نباید قبل از انجام آزمایش مشروبات الکلی مصرف نماید.

ویتامین B12 یک ترکیب پیچیدة اٌرگانومتالیک به نام کوبالامین است. تحت شرایط طبیعی، انسان‎ها کاملاً وابسته به محصولات حیوانی خوراکی (گوشت قرمز، ماهی،تخم مرغ، کره، شیر و پنیر) برای تأمین نیازشان به ویتامین B12 هستند. میکروارگانیسم‏ها، منشاء کوبالامین در زنجیرة غذایی هستند. گیاهان و سبزیجات حاوی مقادیر اندکی ذخیره کوبالامین هستند به جزء آنهایی که به وسیلة آلودگی میکروبی به دست می‏آیند. بنابراین گیاهخوران مقادیر کافی از این مادة غذایی ضروری را دریافت نمی‏کنند. نیاز روزانه در حدود 5- 1 میکروگرم است. جذب ویتامین B12 نیاز به فاکتور داخلی (Intrinsic-Factor) دارد که به وسیلة سلول‎های جداری مخاط فوندوس معده همراه با اسیدکلریدریک ترشح می‏شوند. در ابتدا ویتامین از شکل متصل به پروتئین خود با تأثیر پپسین در محیط اسیدی معده جدا می‏شود. ویتامین آزاد شده سپس به پروتئین اتصالی ویتامین B12 بزاقی به نام کوبالوفیلین‎ها (Cobalophilins) یا متصل کننده‏های- R متصل می‏شوند. در دوازدهه کمپلکس‏های ویتامین R- B12 تحت تأثیر پروتئازهای لوزالمعده شکسته می‏شوند و ویتامین B12 آزاد شده و به IF وصل می‏شود. در این شکل، کم

اندازه گیری سطوح متیل مالونیک اسید و هموسیتئین پلاسما در پیگیری و کمک به تشخیص کمبود ویتامین B12 مؤثر است. بسیاری از شرایط می توانند باعث ایجاد افزایش و یا کاهش در غلظت ویتامین B 12 از جمله:علل افزایش سطح: لوسمی (سرطان خون)، پلی سیتمی ورا، اختلال شدید عملکرد کبد، بیماری میلوپرولیفراتیو، مصرف ویتامین C، مصرف استروژن، مصرف ویتامین A و اورمی.علل کاهش سطح: آنمی پرنیشیوز، سندرم های سوء جذب (مانند بیماریهای التهابی روده، اسپرو، بیماری کرون)، عفونت با انگل های روده ای نظیر دیفلو بوتریوم لاتوم،گاستریت آتروفیک، سندروم زولینگر-الیسون، گاسترکتومی پروکسیمال وسیع، برداشتن ایلئوم انتهایی، آکلرهیدریا، بارداری در 5 تا 25 درصد موارد، کمبود ویتامین C و کمبود اسید فولیک، آسپرین، داروهای ضد تشنج، کلشی سین، مصرف اتانول، هورمون های پیشگیری از بارداری، مصرف سیگار، همودیالیز و مولتیپل میلوما.

هیدرات کلرال موجب افزایش سطح ویتامین B12 می شود.بسیاری از داروها قادرند با جذب کوبالامین (Cb1) و یا اسید فولیک منجر به نتایج کاهش کاذب گردند؛ از جمله داروهای کموتراپی (متوتروکسات)؛ داروهای ضدمالاریا (پریمتامین)؛ دیورتیک‏ها (تری‏آمترن)؛ داروی ضدپروتوزوآ (پنتامیدین، ایزوتیونات)؛ ضدباکتری (تری‏متوپریم)؛ ضدتشنج (فنی‏توئین)؛ خواب‏آورها (باربیتورات)؛ ضدبارداری (OCP)؛ ضدسل (سیکلوسرین، پارا-آمینوسالیسیلیک اسید)؛ ضدنقرس (کلشی‏سین) و کاهش دهنده‏های قندخون (مت فورمین، فن‏فورمین( .کوبالامین در مواجه با نور از بین می‏رود.تجویز دوز بالای بیوتین (>5 mg/day ) 8 ساعت قبل از انجام ازمایش، موجب تداخل در نتایج آزمون می گردد.تجویز اخیر ویتامین B12 می تواند منجر به غلظت های سرمی نرمال یا بالا رفته گردد.در روش RIA مصرف رادیو نوکلوئیدها در کمتر از 24 ساعت پیش از انجام ازمایش موجب تداخل در نتایج می گردد.در موارد نادری، بعضی از افراد که در معرض آنتی ژنهای حیوانات قرار دارند، ممکن است آنتی بادی ایجاد شده بر ضد این آنتی ژنها در نتایج آزمون تداخل نماید.همولیز گلبول­های قرمز بصورت کاذب موجب بالا رفتن سطح کوبالامین

30 روز در دمای 20- درجه سانتیگراد